Навіны

Javascript зараз адключаны ў вашым браўзеры.Некаторыя функцыі гэтага сайта не будуць працаваць, калі JavaScript адключаны.
Зарэгіструйцеся з вашымі канкрэтнымі дадзенымі і канкрэтным прэпаратам, які вас цікавіць, і мы супаставім інфармацыю, якую вы падаеце, з артыкуламі ў нашай шырокай базе даных і неадкладна адправім вам копію ў фармаце PDF па электроннай пошце.
Ding Jingnuo, Чжао Вэйфэн, аддзяленне інфекцыйных хвароб, Першая даччыная бальніца Універсітэта Сучжоу, горад Сучжоу, правінцыя Цзянсу, 215000 Тэл.пухліны стрававальнай сістэмы з 5-гадовай агульнай выжывальнасцю 14,1%.У многіх пацыентаў з ГЦК дыягнастуецца на прасунутай стадыі, таму ранні скрынінг неабходны для зніжэння смяротнасці ад ГЦК.У дадатак да часта выкарыстоўваных паказчыкаў выяўлення, такіх як альфа-фетапратэін сыроваткі крыві (AFP), лектын-рэактыўны альфа-фетапратэін крышталіка (AFP-L3) і анамальны протромбін (пратэін II, выкліканы дэфіцытам вітаміна K, PIVKA-II), метады вадкаснай біяпсіі Было паказана, што ён мае дыягнастычнае значэнне пры выяўленні ГЦК.У параўнанні з інвазівными працэдурамі вадкасная біяпсія можа выявіць цыркулююць злаякасныя метабаліты.Метады вадкаснай біяпсіі выяўляюць цыркулюючыя опухолевые клеткі, цыркулюючую ДНК пухліны, цыркулюючую РНК і экзасомы і выкарыстоўваюцца для ранняга скрынінга, дыягностыкі і прагнастычнай ацэнкі ГЦК.У гэтым артыкуле разглядаецца малекулярная біялогія і прымяненне розных метадаў вадкаснай біяпсіі для вылучэння перспектыўных біямаркераў, якія могуць быць жыццяздольнымі варыянтамі ранняй ацэнкі ГЦК для паляпшэння ранняга скрынінга груп высокай рызыкі ГЦК.Ключавыя словы: методыка вадкаснай біяпсіі, гепатоцеллюлярную карцынома, група высокай рызыкі.
Гепатоцеллюлярную карцынома (ГЦК) - распаўсюджаная злаякасная пухліна стрававальнага гасцінца, займае шостае месца сярод новых выпадкаў злаякасных пухлін як у мужчын, так і ў жанчын.1 Ва ўсім свеце рак печані з'яўляецца трэцяй па значнасці прычынай смерці ад раку пасля рака лёгкіх і колоректального рака, на яго долю прыпадае 8,3% смерцяў, звязаных з ракам, ад усіх злаякасных новаўтварэнняў.1 Прагноз ГЦК цесна звязаны са стадыяй на момант пастаноўкі дыягназу.Асноўнымі прычынамі дрэннай выжывальнасці пры ГЦК з'яўляюцца внутріпеченочного метастазы, опухолевые тромбы партальнай вены і аддаленыя метастазы, якія выключаюць рэзекцыю, і многія з гэтых характарыстык ужо прысутнічаюць у пацыентаў на момант пастаноўкі дыягназу.
Зыходзячы з рэкамендацый па дыягностыцы і лячэнні, асноўнымі фактарамі рызыкі развіцця ГЦК з'яўляюцца цыроз печані, хранічная інфекцыя вірусам гепатыту B (HBV) або вірусам гепатыту C (HCV), алкагольная тлушчавая хвароба печані і неалкагольная тлушчавая хвароба печані (НАЖБП ).2 Акрамя таго, фактары рызыкі ГЦК ўключаюць прыём ежы, забруджанай афлатаксінам, шыстасаматоз, іншыя прычыны цырозу, сямейны анамнез рака печані, дыябет, атлусценне, курэнне і медыкаментознае пашкоджанне печані.Групы рызыкі 35 і 45 гадоў павінны рэгулярна праходзіць медыцынскія агляды.Ранні скрынінг - важная стратэгія ранняга лячэння для паляпшэння агульнай выжывальнасці пацыентаў з ГЦК.
Такія біямаркеры, як AFP, AFP-L3 і PIVKA-II, рэкамендуюцца для ранняга скрынінга HCC3,4.Метады вадкаснай біяпсіі паказалі шматспадзеўныя вынікі ў ранняй дыягностыцы і ацэнцы лячэння.5,6 Значны прагрэс быў дасягнуты ў вадкай біяпсіі ГЦК, якая можа мець больш высокую адчувальнасць і спецыфічнасць, чым звычайна выкарыстоўваюцца сыроватачна маркеры, такія як AFP (табліца 1).
АФП з'яўляецца шырока выкарыстоўваным біямаркерам пры ГЦК і ў цяперашні час з'яўляецца найбольш падрабязным біямаркерам, які шырока выкарыстоўваецца для ранняга скрынінга, дыягностыкі і ацэнкі захворвання.Пастаянна павышаны ўзровень АФП лічыцца фактарам рызыкі прагрэсавання ГЦК.7,8 Каэфіцыент выяўлення малой гепатоцеллюлярной карцыномы (sHCC) расце з развіццём ультрагукавога даследавання і кампутарнай тамаграфіі, і было выяўлена, што AFP асабліва неадчувальны да выяўлення hHCC ў клінічнай практыцы.Па дадзеных рэтраспектыўнага многоцентрового даследаванні9, АФП станоўчы быў знойдзены ў 46% (616/1338) выпадкаў HCC і 23,4% (150/641) выпадкаў sHCC.Акрамя таго, узровень АФП павышаны ў пацыентаў з хранічнымі захворваннямі печані і цырозам.10 Такім чынам, АФП мае абмежаваны эфект скрынінга для sHCC.11 У адпаведнасці з Азіяцка-Ціхаакіянскімі рэкамендацыямі па клінічнай практыцы гепатацэлюлярнай карцыномы, выкарыстанне АФП не рэкамендуецца.12 Клінічныя дадзеныя сведчаць аб тым, што PIVKA-II пераўзыходзіць AFP пры лячэнні ГЦК і што камбінацыя PIVKA-II і AFP мае больш высокая дыягнастычная каштоўнасць пры ГЦК.13 У параўнанні з біяпсіяй тканін, вадкасная біяпсія ў першую чаргу выяўляе метабаліты, звязаныя з пухлінай, у вадкасцях арганізма (кроў, сліна, плеўральная вадкасць, спіннамазгавая вадкасць або мача) і менш інвазіўная для тканін.14 Акрамя таго, вадкія біяпсіі могуць адлюстроўваць злаякасныя асаблівасці, якіх няма ў тканіны першаснай пухліны.15 Вадкія біяпсіі яшчэ не апрабаваны ў клінічнай практыцы для ўсіх тыпаў пухлін, але іх дыягнастычны патэнцыял пры раку прыцягвае ўвагу анколагаў.16 Біяпсія вадкасці дазваляе выявіць цыркулюючыя опухолевые клеткі (ЦПК), цыркулюючую ДНК пухліны (кДНК), цыркулюючую свабодную РНК (экРНК) і экзасомы.У гэтым артыкуле мы абмяркуем характарыстыкі, ролю і прымяненне розных метадаў вадкаснай біяпсіі ў раннім скрынінгу груп высокай рызыкі ГЦК.
Пазаклеткавая ДНК (cfDNA) ва ўзорах крыві здаровых людзей была ўпершыню апісана ў 1948 годзе Mandel і соавт.17 cfDNA - гэта бясклетачны фрагмент ДНК даўжынёй прыблізна 160-180 п.н., які паходзіць галоўным чынам з лімфацытаў і миелоидных клетак.ctDNA - гэта спецыфічны мутантны фрагмент ДНК, вызвалены опухолевыми клеткамі ў перыферычную кроў, які ўяўляе сабой геномную інфармацыю опухолевых клетак пасля пэўных патафізіялагічных працэсаў, уключаючы некроз, апоптоз і экскрэцыю.Доля ктДНК у агульнай колькасці цДНК моцна вар'іруецца ў залежнасці ад тыпу пухліны, і, як паведамляецца, фрагменты кДНК звычайна маюць даўжыню менш за 167 пн.18 Даследаванне Андэрхіла паказала, што фрагменты вкДНК звычайна карацейшыя за звычайную вкДНК.19 У параўнанні са здаровымі асобамі агульная даўжыня фрагментаў вкДНК у крыві анкалагічных пацыентаў карацейшая, таму ўкДНК можна выкарыстоўваць як індыкатар ранняга скрынінга пухліны.Узбагачэнне пэўных паднабораў даўжынь фрагментаў вкДНК можа палепшыць выяўленне кДНК, звязанай з неметастатическими саліднымі пухлінамі.Даследаванні паказалі, што ctDNA сустракаецца больш чым у 75% запушчаных формаў раку падстраўнікавай залозы, тоўстай кішкі, мачавой бурбалкі, страўнікава-кішачнага гасцінца, печані, яечнікаў, малочнай залозы, меланомы, галавы і шыі.20,21 Аднак колькасць ктДНК у крыві залежыць ад размяшчэння пухліны.22 У даследаванні, праведзеным Bettegoud, у пацыентаў з колоректальным ракам, ракам малочнай залозы, печані, лёгкіх і прадсталёвай залозы было ўстаноўлена, што ўзровень кДНК у крыві вышэй, чым у іншых відах раку.Наадварот, у пацыентаў з ракам паражніны рота, падстраўнікавай залозы, страўніка і глиомой канцэнтрацыя кДНК у крыві была ніжэй.дваццаць адзін
Паколькі ctDNA змяшчае тыя ж генетычныя мутацыі, што і клеткі першаснай пухліны, кДНК можа быць выкарыстана для выяўлення гетэрагенных мутацый, характэрных для пухліны, і эпігенетычных змен, у тым ліку метылявання, гидроксиметилирования, адзінкавых нуклеатыдных варыяцый і варыяцый колькасці копій.дваццаць тры
Метыляванне ДНК - адна з найбольш распаўсюджаных эпігенетычных змен, якія прыводзяць да рэпрэсіі генаў.У параўнанні з нармальнымі клеткамі існуюць адрозненні ў агульным узроўні метилирования геному опухолевых клетак, асабліва ў метилировании генаў-супрессоров пухліны, якія можна выявіць на ранняй стадыі, што сведчыць аб тым, што змены ў метилировании ДНК могуць быць паказчыкам ранняга выяўленне опухолеобразования.Гены-супрессоры пухліны, звязаныя з HCC, могуць быць інактываваны метилированием промотора, тым самым стымулюючы опухолеобразование.24 Метыляванне ДНК з'яўляецца ідэальным маркерам для ранняй дыягностыкі пухлін дзякуючы яго тканкавай спецыфічнасці, магчымасці выяўлення і незалежнасці ад узросту.Акрамя таго, метыляванне ДНК больш распаўсюджана ў параўнанні з саматычнымі мутацыямі, паколькі ў кожнай вобласці геному-мішэні маецца больш мэтавых абласцей і некалькі змененых сайтаў CpG.25 У дадатак да некалькіх сайтаў CpG, вялікая колькасць незалежных гиперметилированных локусов ў ctDNA былі ідэнтыфікаваныя ў DBX2, THY1, MT1M, INK4A, VIM, FBLN1 і RGS10.26 Xu et al.Параўнанне ўзораў вкДНК ад 1098 пацыентаў з ГЦК і 835 здаровых людзей кантролю выявіла, што гены, звязаныя з ГЦК, моцна карэлююць з адпаведнымі сігнатурамі метылявання кДНК плазмы.25 На аснове лабараторнага аналізу была распрацавана мадэль прагназавання, якая змяшчае 10 маркераў метылявання з адчувальнасцю і спецыфічнасцю 85,7% і 94,3%, адпаведна, і гэтыя маркеры моцна карэлююць з масай пухліны, стадыяй пухліны і адказам на лячэнне.Гэтыя вынікі паказваюць, што выкарыстанне маркераў метылявання кДНК мае вялікія перспектывы ў дыягностыцы, маніторынгу і прагнозе ГЦК.У мадэлі метылявання, якая складаецца з трох аберрантна метыляваных генаў (APC, COX2, RASSF1A) і адной мікраРНК (miR203), прадстаўленай Lu et al27, адчувальнасць і спецыфічнасць мадэлі 27 для дыягностыкі ГЦК, звязанага з HBV, былі супастаўныя.80 %.Акрамя таго, мадэль можа выявіць 75% пацыентаў з недиагностированным ГЦК з узроўнем АФП 20 НГ/мл.Ген бялку сямейства 1A дамена, звязанага з Ras (RASSF1A), з'яўляецца асноўнай паўтаральнай паслядоўнасцю ДНК у геноме чалавека.Араухо і інш.прыйшоў да высновы, што гиперметилирование промотора RASSF1A можа быць каштоўным биомаркером для ранняга скрынінга HCC і патэнцыйнай малекулярнай мішэнню для эпигенетической тэрапіі.28 У адным даследаванні гиперметилирование промотора RASSF1A ў сыроватцы было выяўлена ў 73,3% пацыентаў з ГЦК.29 Доўгі ўкрапванне нуклеатыднага элемента 1 (LINE-1) з'яўляецца яшчэ адным вельмі актыўным медыятарам рэтратранспазіцыі.Гіпаметыляванне LINE-1 было выяўлена ў ДНК 66,7% узораў сыроваткі ГЦК і было звязана з раннім рэцыдывам і дрэннай выжывальнасцю пасля радыкальнай рэзекцыі.29 Гіперметыляванне - гэта распаўсюджаны генетычны працэс, які адыгрывае ўнікальную ролю ў развіцці цырозу печані і ГЦК.30 Наадварот, гидроксиметилирование - гэта працэс дэметилирования, які выклікае рэактывацыю і экспрэсію генаў, і выяўленне прадукту 5-гидроксиметилцитозина (5-hmC) у гэтым працэсе можа быць выкарыстана для ідэнтыфікацыі пухліны.Метыляванне і гидроксиметилирование кДНК звязана з опухолеобразованием і можа спрыяць ранняму скрынінгу ГЦК.У ходзе даследавання з удзелам 2554 суб'ектаў ва ўзорах вкДНК быў знойдзены 31 геномны 5-hmC, а 32 гены былі ідэнтыфікаваны шляхам параўнання паслядоўнасцей 5-hmC у пацыентаў з ГЦК і груп высокай рызыкі, напрыклад, з хранічнымі захворваннямі.Дыягнастычныя мадэлі захворванняў печані.і цыроз.Гэтая мадэль пераўзыходзіла АФП у адрозненні ГЦК ад непухліннай тканіны.
Мутацыі ў кадуючых абласцях могуць прывесці да парушэнняў транскрыпцыі, якія могуць прывесці да зменаў у паслядоўнасцях бялку і ў канчатковым выніку да раку.Адзінкавыя нуклеатыдныя варыянты з'яўляюцца важнымі геномнымі маркерамі для ранняга скрынінга пухлін з-за іх высокай тканкавай надзейнасці і высокай пухліннай і тканкавай спецыфічнасці.Шматлікія даследаванні, звязаныя з HCC з выкарыстаннем секвенирования наступнага пакалення (NGS) для секвенирования экзома і цэлага генома рака, выявілі агульныя мутаваныя клеткавыя гены, такія як TP53 і CTNNB1, а таксама некалькі, уключаючы ARID1A, MLL, IRF2.Новыя гены ATM, CDKN2A, FGF19, PIK3CA, RPS6KA3 і JAK1 дэманструюць умераны ўзровень мутацый. Аналіз функцыі мутантнага гена паказвае, што змены ў рэмадэляванні храмаціну, Wnt/β-катэніне і перадачы сігналу JAK/STAT, шляху клеткавага цыклу P53, эпігенетычных мадыфікатараў, шляхах акісляльнага стрэсу, шляху PI3K/AKT/MTOR і RAS/RAF/ Шлях MAPK-киназы гуляе вырашальную ролю ў анкагенезе ГЦК.32,33 У даследаванні, у якім былі выяўлены мутацыі, звязаныя з пухлінай, Хуанг і інш выявілі, што частата звязаных з пухлінай мутацый, якія залежаць ад ктДНК, складала 19,5%, а спецыфічнасць - 90%. .34 Акрамя таго, пацыенты, якія перанеслі судзінкавую інвазію, часцей мелі мутацыі ctDNA (P = 0,041) і меншую безрецидивную выжывальнасць (P <0,001). Аналіз функцыі мутантнага гена паказвае, што змены ў рэмадэляванні храмаціну, Wnt/β-катэніне і перадачы сігналу JAK/STAT, шляху клеткавага цыклу P53, эпігенетычных мадыфікатараў, шляхах акісляльнага стрэсу, шляху PI3K/AKT/MTOR і RAS/RAF/ Шлях MAPK-киназы гуляе вырашальную ролю ў анкагенезе ГЦК.32,33 У даследаванні, у якім былі выяўлены мутацыі, звязаныя з пухлінай, Хуанг і інш выявілі, што частата звязаных з пухлінай мутацый, якія залежаць ад ктДНК, складала 19,5%, а спецыфічнасць - 90%. .34 Акрамя таго, пацыенты, якія перанеслі судзінкавую інвазію, часцей мелі мутацыі ctDNA (P = 0,041) і меншую безрецидивную выжывальнасць (P <0,001).Аналіз функцыі мутантнага гена паказвае, што змены ў перабудове храмаціну, сігналізацыі Wnt/β-катэнін і JAK/STAT, шляху клеткавага цыклу P53, эпігенетычных мадыфікатараў, шляхах акісляльнага стрэсу, шляху PI3K/AKT/MTOR і шляху кіназы RAS/RAF/MAPK крытычную ролю ў ГЦК tumorigenesis.32,33 У даследаванні, якое выявіла звязаныя з пухлінай мутацыі, Huang et al.выявілі, што частата ctDNA-залежных мутацый, звязаных з пухлінай, складае 19,5%, а спецыфічнасць - 90%..34 Акрамя таго, у пацыентаў з сосудистой інвазіяй часцей сустракаліся мутацыі цДНК (P=0,041) і больш кароткая безрецидивная выяўленасць (P<0,001). .34 Акрамя таго, у пацыентаў з судзінкавай інвазіяй было больш мутацый кДНК (P=0,041) і больш кароткая выжывальнасць без захворвання (P<0,001).Функцыянальны аналіз мутантных генаў выявіў рэмадэляванне храмаціну, сігналізацыю Wnt/β-катэнін і JAK/STAT, шлях клеткавага цыклу P53, эпігенетычныя мадыфікатары, шлях акісляльнага стрэсу, шлях PI3K/AKT/MTOR і RAS/RAF/MAPK киназный шлях гуляюць вырашальную ролю ў анкагенезу ГЦК. 32,33 在一项检测到肿瘤相关突变的研究中，Huang 等人发现肿瘤相关突变依赖于ctDNA 的频率为19.5%，特异性为90% .34 此外，经历血管侵犯的患者更有可能发生ctDNA突变（P=0,041）和更短的无复发生存期（P<0,001）。. 32.33 在 一 项 检测 到 相关 突变 突变 的 ， ， huang 等 发现 肿瘤 相关 突变 依赖于 ctdna 的 为 为 为 为 为 为 为 为 为 突变 突变 突变 突变 突变 突变 发生 可能 更 更 更 更 可能 可能 发生 发生 发生 发生 突变 突变 突变 突变 （（（（（（为 为 为 为 此外 血管 侵犯 更 可能 发生 发生 发生 发生 发生 发生 发生 发生 发生 发生 发生 发生 突变 突变 突变 突变 （（（（（（（（为 为 更 此外 血管 侵犯 的 可能 发生 发生 发生 发生 发生 ctdna 突变 （（p = 0,041） 更 更 更 更 更 更 更 更 更 更 更 更 更 更 血管.短的无复发生存期（P<0,001）.32,33 У даследаванні, якое выявіла мутацыі, звязаныя з пухлінай, Huang et al.выявілі, што звязаныя з пухлінай мутацыі на 19,5% залежаць ад кДНК са спецыфічнасцю 90% 34. Акрамя таго, у пацыентаў, якія перанеслі судзінкавую інвазію, больш верагоднасць развіцця кДНК.мутацыя (P = 0,041) і больш кароткая безрэцыдыўная выяўляльнасць (P <0,001). мутацыя (Р = 0,041) і больш кароткая выжывальнасць без захворвання (Р <0,001).Іншы распаўсюджаны ген драйвера HCC - TP53, частата мутацый якога перавышае 30%.Даследаванні паказалі, што частата мутацый TP53 у ctDNA ў крыві і мачы вагаецца ад 5% да 60%.35 Даследаванне Ёхана паказала, што спектр мутацый ctDNA пры познім ГЦК мае аналагічную хуткасць мутацый, што і ранні ГЦК, уключаючы прамотар TERT (51%), TP53 (32%), CTNNB1 (17%), PTEN (8%), мутацыі ў AXIN1 ., ARID2, KMT2D і TSC2 (па 6 %).36 Онкоген β-катэнін (CTNNB1) гуляе важную ролю ў сігнальным шляху Wnt.Каактыватар транскрыпцыі CTNNB1 можа спрыяць экспрэсіі генаў, што можа прывесці да праліферацыі клетак, інгібіравання апоптозу і ангіягенезу.CTNNB1 можа таксама ўзаемадзейнічаць з TERT, каб выклікаць трансфармацыю гепатацытаў.33 Прамотар TERT часта мутаваны ў некаторых салідных пухлінах.Змены ў TERT, адным з самых ранніх генетычных змяненняў пры злаякаснай трансфармацыі ГЦК, могуць прывесці да рэактывацыі тэламеразы ў цыратычных гепатацытах і могуць спрыяць праліферацыі і прадухіляць старэнне.Паведамляецца, што мутацыі ў прамотары 33-37 TERT адбываюцца ў 59-90% пацыентаў з праліфератыўнымі вузельчыкамі печані і раннім ГЦК і звязаныя з выжывальнасцю.38
Змены колькасці копій (CNA) - важны падтып саматычных мутацый.Даследаванні паказалі, што шырока распаўсюджаная і факальная нагрузка CNA з'яўляецца геномнай прыкметай, здольнай прадказаць імунную інфільтрацыю пухліны і выключэнне пры некаторых відах раку.39 Актыўная сігналізацыя інфільтрацыі, высокая цыталітычная актыўнасць, цяжкае запаленне і генетычныя маркеры, звязаныя з прэзентацыяй антыгена пры ГЦК.Аналіз масіва дадзеных аднануклеатыдных палімарфізму ў 477 абследаваных выявіў нізкую нагрузку на ЦНС.Наадварот, храмасомна нестабільныя пухліны з высокай экстэнсіўнай нагрузкай на CNA дэманстравалі прыкметы імуннага адрыньвання і былі звязаны з праліферацыяй, аднаўленнем ДНК і дысфункцыяй TP53.Сюй і інш.паказалі, што група HCC мела больш высокі бал CNA, чым група хранічнага захворвання печані.40 Выкарыстанне секвенирования цэлага генома адной клеткі выявіла, што CNA з'яўляюцца на ранніх стадыях гепатаканцэрагенезу і застаюцца адносна стабільнымі падчас прагрэсавання пухліны.41 Чунг і інш.выявілі, што ўзровень вкДНК быў значна павышаны ў пацыентаў з ГЦК і што агульнагеномныя CNA ў вкДНК былі важным незалежным прагнастычным маркерам у пацыентаў з ГЦК, якія атрымлівалі сарафеніб.42 Пацыенты з больш высокім цяжарам CNA мелі больш шанцаў прагрэсаваць захворванне і смерць, чым тыя з меншым цяжарам CNA.Олерых і інш.выявілі, што індэкс нестабільнасці колькасці копій (CNI) можна выкарыстоўваць для ацэнкі CNA ў вкДНК хворых на рак.Яны адзначылі, што ў пацыентаў з развітым ракам балы CNI значна вышэй, чым у кантрольнай групе, якая ацэньвае адказ пацыента на сістэмную хіміятэрапію і імунатэрапію.43 Гэтыя вынікі сведчаць аб тым, што CNAs, знойдзеныя ў вадкіх узорах біяпсіі, могуць служыць прагнастычным паказчыкам у пацыентаў з ракам на запушчаных стадыях.ГЦК на фоне сістэмнай тэрапіі.
У цяперашні час метады, якія выкарыстоўваюцца для выяўлення ктДНК, можна падзяліць на мэтавыя і нетаргетные.Карацей кажучы, мэтавыя метады, такія як лічбавая палімеразная ланцуговая рэакцыя (dPCR), лічбавая PCR BEAMing, Amplification Refractory Mutation System-PCR, Capp-Seq і Tam-Seq, вельмі адчувальныя да загадзя вызначаных генаў.Немэтавыя метады, такія як секвеніраванне поўнага геному і NGS, даюць поўнае ўяўленне пра ўвесь геномны ландшафт.44 У параўнанні з панэлямі-мішэнямі, секвеніраванне цэлага геному можа выяўляць не толькі кропкавыя мутацыі і ўстаўкі, але таксама перастаноўкі і варыяцыі колькасці копій.прагноз, а ЦТК і вкДНК з'яўляюцца добрымі індыкатарамі, якія можна выкарыстоўваць для дынамічнага назірання за ГЦК.45 Акрамя таго, аналіз вкДНК можа быць больш карысным для выяўлення ГЦК.Ян і інш.паказалі, што кфДНК у плазме пацыентаў з ГЦК было значна вышэй, чым у пацыентаў з фіброз печані і здаровых кантрольных асоб.Чакаецца, што ў параўнанні з AFP ctDNA будзе лепшым скрынінгавым маркерам ранняга ГЦК.46 У праспектыўным даследаванні 47 вадкіх біяпсіяў, якія правяралі вкДНК і бялок у папуляцыі, было паказана, што яны эфектыўныя ў дыферэнцыяцыі пацыентаў з ГЦК ад пацыентаў без ГЦК.Падчас назірання за 331 нармальным і АФП-адмоўным пацыентам пры УГД адчувальнасць і спецыфічнасць вкДНК для дыягностыкі ГЦК склалі 100% і 94% адпаведна, таму кДНК магла выявіць ГЦК у бессімптомных HBsAg серапазітыўных асоб.У даследаванні Yeo48 была выяўлена высокая частата (92,5%) гиперметилирования промотора RASSF1A ў пацыентаў з ГЦК.Акрамя таго, Xu et al.стварылі дыягнастычную мадэль для прагназавання ГЦК з выкарыстаннем панэлі спецыфічных маркераў метилирования са спецыфічнасцю і адчувальнасцю 90,5% і 83,3% адпаведна.Панэль дазваляе адрозніць пацыентаў з ГЦК ад пацыентаў з іншымі захворваннямі печані, што лепш, чым АФП.Яны таксама выявілі, што нармальныя кантрольныя групы з станоўчым тэстам могуць мець фактары рызыкі ГЦК, такія як інфекцыя HBV або ўжыванне алкаголю ў анамнезе.25 Мы мяркуем, што фактары высокай рызыкі ГЦК могуць спрыяць гіперметыляванню вкДНК, што затым спрыяе прагрэсаванню ГЦК, і, такім чынам, вкДНК можа гуляць ключавую ролю ў скрынінгу груп высокай рызыкі.Цай і інш.абагульніць поўны спектр мутацый ctDNA і прапанаваць надзейную стратэгію ацэнкі пухліннага цяжару ў пацыентаў.49 Гэтая стратэгія можа ідэнтыфікаваць опухолеобразование ў сярэднім за 4,6 месяца да змены візуалізацыі і паказала лепшую дыягнастычную эфектыўнасць у параўнанні з сыроватачна биомаркерами AFP, AFP-L3 і PIVKA-II.Дыягнастычная каштоўнасць тэставання кДНК была прадэманстравана, калі ацэнка выявы недаступная, таму тэставанне кДНК мае значэнне для дыягностыкі ранняга ГЦК у групах высокай рызыкі.Нядаўна навукоўцы выкарыстоўвалі тэхналогію NGS для аналізу паказчыкаў шматмернай генетычнай варыяцыі (уключаючы 5-гідраксіметылцытазін, 5'-матыў, фрагментацыю, след нуклеасомы, HIFI) у 3204 клінічных узорах і вкДНК.50 паўторна правераных мадэляў HIFI з трыма незалежнымі наборамі для навучання, тэставання і тэставання паказалі стабільную і надзейную дыскрымінацыю паміж папуляцыямі HCC і не-HCC з адчувальнасцю 95,79% і 95,42% у тэставых і тэставых наборах для HCC адпаведна.Пол склаў 95,00% і 97,83% адпаведна.Дыягнастычная каштоўнасць метаду HIFI вышэй, чым АФП, пры адрозненні ГЦК ад цырозу.Акрамя таго, ctDNA таксама выкарыстоўваецца ў хірургічным лячэнні.Ацушы і інш.вызначылі перадаперацыйныя ўзроўні ctDNA ў сыроватцы крыві ў пацыентаў з HCC і выявілі, што частата рэцыдываў і частата пазапячоначных метастазаў у кДНК станоўчай групе былі значна вышэй, чым у кДНК адмоўнай групе, і ўзроўні кДНК значна карэлявалі.пры прагрэсаванні пухліны.51 З'яўляючыся вельмі адчувальным біямаркерам, ктДНК можа прадказаць здольнасць ГЦК пранікаць у сасуды.Ван і інш.правялі полногеномное секвенирование 46 пацыентаў з ГЦК, і шматмерны аналіз паказаў, што парогавае значэнне частоты алеляў варыянту кДНК для інвазіі ў микрососуды складае 0,83%, адчувальнасць 89,7% і спецыфічнасць 80,0%.незалежны фактар ​​рызыкі мікрасасудзістай інвазіі пры аперабельным ГЦК, што дазваляе выказаць здагадку, што кДНК можа дапамагчы ў аптымальным лячэнні.У заключэнне можна сказаць, што ctDNA цалкам удзельнічае ва ўзнікненні і развіцці ГЦК і можа выкарыстоўвацца для ранняга скрынінга, хірургічнай ацэнкі і маніторынгу захворвання.
КТК - гэта злаякасныя клеткі, атрыманыя з першасных пухлін або метастазаў, якія метастазуюць у кроў.Опухолевые клеткі вылучаюць матрыксныя металапратэіназы (ММР), якія расшчапляюць базальную мембрану, што дазваляе клеткам пухліны пранікаць непасрэдна ў крывяносныя і лімфатычныя пасудзіны.Тым не менш, большасць CTCs хутка ліквідуюцца аноікісам, імуннай атакай або стрэсам зруху.53 Эпітэліяльна-мезенхімальных пераход (EMT) дазваляе CTCs быць лёгка ізаляваны ад першаснай тканіны пухліны, ўварвацца ў капіляры, і атрымаць значна палепшаную выжывальнасць, метастазірованія, інвазівных і ўстойлівасць да лекаў.Даследаванні паказалі, што існуе глыбокая гетэрагеннасць сярод розных опухолевых клетак у першасных метастатических пухлінах.Такім чынам, аналіз CTC можа прывесці да поўнага разумення гетэрагеннасці опухолевых клетак.54
Спецыфічныя маркеры для HCC-асацыяваных CTCs ўключаюць гліпікан-3 (GPC3), азіялагікапратэінавы рэцэптар (ASGPR), малекулу адгезіі эпітэліяльных клетак (EpCAM) і маркеры, звязаныя са ствалавымі клеткамі, такія як CD44, CD90, 55 і малекула міжклеткавай адгезіі 1 (ICAM1).) .56 Маркер GPC3 - гэта бялок, замацаваны на клеткавай мембране, які клінічна выкарыстоўваецца для паталагічнага аналізу і характарыстыкі ГЦК.57 Экспрэсія GPC3 часцей сустракаецца ў опухолевых клетках HCC з прамежкавай і нізкай дыферэнцыявання і спрыяе пазапячоначнай міграцыі;акрамя таго, наяўнасць GPC3+ CTCs паказвае на метастатический ГЦК.58 ASGPR - гэта трансмембранный бялок, які экспрессируется толькі на паверхні гепатацытаў і моцна экспрессируется ў добра дыферэнцыраванай ГЦК.EpCAM з'яўляецца адным з найбольш часта выкарыстоўваюцца звязаных з мембранай бялкоў для захопу CTC.EpCAM быў ідэнтыфікаваны як павярхоўны маркер клетак ГЦК з характарыстыкамі ствалавых клетак,59 што карэлюе з рознымі клініка-паталагічнымі асаблівасцямі ГЦК, такімі як судзінкавая інвазія, ацэненыя ўзроўні АФП і запушчаная стадыя рака печані ў Барселонскай бальніцы (BCLC).Фенатып 60 CTC EMT вельмі метастатычны.54 працэсы EMT ў ЦТК спрыяюць метастазірованію ГЦК.Экспрэсія маркераў EMT, такіх як віменцін, твіст, E-box zinc finger binding (ZEB) 1, ZEB2, snail, slug і E-cadherin, была вывучана ў CTC, атрыманых з печані пацыентаў з ГЦК.58 Сістэма CanPatrol™, распрацаваная Cheng [61], класіфікавала CTCs на тры фенатыпічнае падгрупы на аснове пераважна выяўленых маркераў: эпітэліяльны фенатып (EpCAM, CK8/18/19), мезенхімальны фенатып (віменцін, спіраль) і змешаныя фенатыпы.У 176 пацыентаў агульны ЦТК пераўзыходзіць АФП пры дыферэнцыяцыі ГЦК ад дабраякаснага захворвання печані.Значэнні AUC для агульнага CTC, AFP і камбінаванага агульнага CTC і AFP складалі 0,774 (95% дзі, 0,704–0,834), 0,669 (95% дзі, 0,587–0,750) і 0,821 (95% дзі, 0,756–0,886). ).), адпаведна.Класіфікацыя CTC, заснаваная на EMT, можа прадказаць дыягназ ГЦК, ранні рэцыдыў, метастазы і меншы агульны час.
У цяперашні час метады выяўлення РСК ўключаюць фізічныя метады і біялагічныя метады.Фізічныя метады, якія часта называюць узбагачэннем на аснове біяфізічных уласцівасцей, у асноўным залежаць ад фізічных уласцівасцей CSC, такіх як памер, шчыльнасць, зарад, рухомасць і здольнасць да дэфармацыі.У залежнасці ад фізічных уласцівасцей існуюць розныя метады, такія як сістэмы на аснове фільтрацыі, дыэлектрафарэз і г. д. Апошні, таксама вядомы як узбагачэнне на аснове імунаафіннасці, у асноўным заснаваны на звязванні антыген-антыцела, паколькі метад выкарыстоўвае антыцелы супраць спецыфічных для пухліны біямаркераў такія як EpCAM, ASGPR, рэцэптар эпідэрмальнага фактару росту чалавека 2 (HER2), спецыфічны антыген прастаты (PSA), панцытакерацін чалавека (P-CK) і карбамоілфасфатсінтаза 1 (CPS1).62 Іншы тып, званы метадам без узбагачэння, выкарыстоўвае праточную цытаметрыю для дыферэнцыяцыі ЦТК ад лейкацытаў на падставе большага суадносін і памеру ядра да цытаплазмы.У цяперашні час адзіным зацверджаным FDA тэстам для выяўлення CTC з'яўляецца сістэма Cell-Search™, якая выкарыстоўвае маркер клетачнай паверхні EpCAM. Тым не менш, камбінаванае выяўленне CTC на аснове маркераў можа павялічыць узровень пазітыўнасці.54 Сумесь антыцелаў супраць ASGPR і CPS1 дасягнула 91% выяўлення CTC у пацыентаў з HCC.63 Zhang і інш выкарыстоўвалі CTC-Chip з антыцеламі супраць ASGPR, P -CK і CPS1 і дыферэнцавалі пацыентаў з ГЦК ад дабраякасных захворванняў печані або раку без ГЦК з частатой 100%.64 Даследаванне, праведзенае Ванг, выявіла CTC EpCAM+ у 60% з 42 пацыентаў з ГЦК і выявіла значную карэляцыю паміж пазітыўнасцю частата і колькасць CTCs са стадыяй TNM.65 Guo et al выявілі, што ацэнка ПЦР, атрыманая з CTC, была павышана ў 125/171 (73%) пацыентаў, у якіх узровень АФП быў <20 НГ/мл з адчувальнасцю 72,5% і спецыфічнасць 95,0%, у параўнанні з 57,0% і 90,0% для АФП пры адсячэнні 20 НГ/мл.66 Спалучэнне АФП і ЦОК можа палепшыць выяўленне ГЦК.45 Лічыцца, што ЦОК маюць перавагу перад АФП пры раннім скрынінгу груп з высокім рызыкай ГЦК. Тым не менш, камбінаванае выяўленне CTC на аснове маркераў можа павялічыць узровень пазітыўнасці.54 Сумесь антыцелаў супраць ASGPR і CPS1 дасягнула 91% выяўлення CTC у пацыентаў з HCC.63 Zhang і інш выкарыстоўвалі CTC-Chip з антыцеламі супраць ASGPR, P -CK і CPS1 і дыферэнцавалі пацыентаў з ГЦК ад дабраякасных захворванняў печані або раку без ГЦК з частатой 100%.64 Даследаванне, праведзенае Ванг, выявіла CTC EpCAM+ у 60% з 42 пацыентаў з ГЦК і выявіла значную карэляцыю паміж пазітыўнасцю частата і колькасць CTCs са стадыяй TNM.65 Guo et al выявілі, што ацэнка ПЦР, атрыманая з CTC, была павышана ў 125/171 (73%) пацыентаў, у якіх узровень АФП быў <20 НГ/мл з адчувальнасцю 72,5% і спецыфічнасць 95,0%, у параўнанні з 57,0% і 90,0% для АФП пры адсячэнні 20 НГ/мл.66 Спалучэнне АФП і ЦОК можа палепшыць выяўленне ГЦК.45 Лічыцца, што ЦОК маюць перавагу перад АФП пры раннім скрынінгу груп з высокім рызыкай ГЦК.Тым не менш, камбінаванае выяўленне CTC на аснове маркераў можа павялічыць працэнт станоўчых вынікаў.54 Сумесь антыцелаў супраць ASGPR і CPS1 дасягнула 91% выяўлення CTC у пацыентаў з HCC.63 Zhang et al.выкарыстаў CTC-Chip з антыцеламі супраць ASGPR, P-CK і CPS1, а таксама адрозніваў пацыентаў з ГЦК ад дабраякасных захворванняў печані або без ГЦК з частатой 100%.частата і колькасць ЦОК са стадыяй TNM.65 Го і суаўтары выявілі, што паказчык ПЦР, атрыманы з ЦОК, быў павышаны ў 125/171 (73%) пацыентаў, у якіх узровень АФП быў <20 нг/мл пры адчувальнасці 72,5% і спецыфічнасць 95,0% у параўнанні з 57,0% і 90,0% для АФП пры ўзроўні парога 20 нг/мл.66 Камбінацыя АФП і ЦОК можа палепшыць выяўленне ГЦК.45 Лічыцца, што ЦОК маюць перавагу перад АФП пры раннім скрынінгу груп. частата і колькасць CTCs са стадыяй TNM.65 Guo et al выявілі, што ПЦР, атрыманая з CTCs, была павышана ў 125/171 (73%) пацыентаў, якія мелі ўзровень АФП <20 НГ/мл з адчувальнасцю 72,5% і спецыфічнасцю 95,0 % у параўнанні з 57,0 % і 90,0 % для АФП пры парогавым узроўні 20 НГ/мл.66 Камбінацыя АФП і КТК можа палепшыць выяўленне ГЦК.45 Лічыцца, што КТК маюць перавагу перад АФП пры раннім скрынінгу групы.з высокім рызыкай ГЦК.Тым не менш, камбінаванае вызначэнне КТК на аснове маркераў можа павялічыць працэнт станоўчых вынікаў.54 Сумесь анты-ASGPR і антыцелаў CPS1 дасягнула 91% хуткасці выяўлення CTC у пацыентаў з HCC.63 Чжан і інш.выкарыстоўвалі чыпы CTC з антыцеламі супраць ASGPR, P-CK і CPS1 і адрознівалі пацыентаў з ГЦК ад дабраякаснага захворвання печані і без ГЦК на 100%.64 Даследаванне Wang вызначыла 60% EpCAM+ CTCs у 42 пацыентаў з HCC і выявіла значную карэляцыю паміж частатой і колькасцю CTCs на стадыі TNM. 65 Guo 等人发现，在AFP 水平<20 ng/mL 的125/171 (73%) 名患者中，CTC 衍生的PCR 评分升高，敏感性为72.5%，特异性为95.0%，而AFP 在截止值为20 нг/мл 时的特异性为57,0% 和90,0%。 65 Guo 等 人 发现 在 在 在 水平 <20 ng/ml 的 125/171 (73%) 名 患者 ， ， ctc 衍生 pcr 评分 ， 敏感性 为 为 72.5%， 为 95.0%， AFP 在 截止 截止 截止 截止 截止 截止截止 截止 截止 截止 截止 截止 截止 截止 截止 截止 截止 截止 截止 截止 截止 截止 截止 截止 截止 截止 截止值 为 为 20ng/ml 时 特异性 为 为 为 57,0% 和 90,0%。65 Го і інш.выявілі, што ў 125/171 (73%) пацыентаў з узроўнем АФП <20 нг/мл паказчыкі ПЦР, атрыманыя з дапамогай ЦОК, былі павышаны з адчувальнасцю 72,5% і спецыфічнасцю 95,0%, у той час як АФП на ўзроўні адсечкі Спецыфічнасць складу 20 нг/мл. выявілі, што ў 125/171 (73%) пацыентаў з узроўнем АФП <20 НГ/мл значэнні ПЦР, атрыманыя з ЦТС, былі павышаны з адчувальнасцю 72,5% і спецыфічнасцю 95,0%, у той час як АФП быў на ўзроўні гранічнай спецыфічнасці складала 20 НГ/мл.мл было 57,0% і 90,0%.66 Камбінацыя ORP і CTC паляпшае выяўленне ГЦК.Лічыцца, што 45 КТК пераўзыходзяць АФП у раннім скрынінгу папуляцый ГЦК высокай рызыкі.Такім чынам, для груп ГЦК з станоўчым ЦТК і групамі высокай рызыкі, тэставанне ЦТК павінна звычайна спалучацца з ультрагукавым даследаваннем і выяўленнем АФП.Тым не менш, CTCs лічацца важнымі прэдыктарамі метастазірованія і рэцыдыву пухліны, і выяўленне CTCs не рэкамендуецца самастойна ў якасці дыягнастычнага інструмента.62 Такім чынам, CTC можа служыць лепшым прагнастычным біямаркерам, чым іншыя маркеры, якія выкарыстоўваюцца ў цяперашні час. Чжоу і інш выявілі, што ў пацыентаў з павышаным лікам EpCAM+ CTC і рэгулятарных Т-клетак рызыка развіцця рэцыдыву ГЦК вышэй, чым у пацыентаў з нізкім лікам CTC, з каэфіцыентам рэцыдываў 66,7% супраць 10,3% (P <0,001).67 Аналагічнае даследаванне было праведзена Zhong et al.68 Акрамя таго, Qi выявіў, што 101 з 112 пацыентаў (90,81%) з ГЦК, у тым ліку з ранняй стадыяй захворвання, былі станоўчыя на CTCs і што вельмі маленькія вузельчыкі ГЦК былі выяўлены пасля 3 да 5 месяцаў назірання. Чжоу і інш выявілі, што ў пацыентаў з павышаным лікам EpCAM+ CTCs і рэгулятарных Т-клетак рызыка развіцця рэцыдыву ГЦК вышэй, чым у пацыентаў з нізкім лікам CTCs, з стаўленнем рэцыдываў 66,7% супраць 10,3% (P <0,001).67 A аналагічнае даследаванне было праведзена Zhong et al.68 Акрамя таго, Qi выявіў, што 101 з 112 пацыентаў (90,81%) з ГЦК, у тым ліку з ранняй стадыяй захворвання, былі станоўчымі на CTCs і што вельмі маленькія вузельчыкі ГЦК былі выяўлены пасля 3 да 5 месяцаў назірання. Чжоу і др.выявілі, што ў пацыентаў з павышаным колькасцю ЦОК EpCAM+ і рэгулятарных Т-клетак рызыка развіцця рэцыдываў ГЦК быў вышэй, чым у пацыентаў з нізкім колькасцю ЦОК, з каэфіцыентам рэцыдываў 66,7% супраць 10,3% (P <0,001)67. Zhou et al выявілі, што ў пацыентаў з павышаным EpCAM+ CTCs і рэгулятарнымі Т-клеткамі рызыка рэцыдыву ГЦК вышэй, чым у пацыентаў з нізкім CTCs, з частатой рэцыдываў 66,7% супраць 10,3% (P<0,001)67.Аналагічнае даследаванне было праведзена Zhong et al.68. Акрамя таго, Qi выявіў, што 101 з 112 пацыентаў (90,81%) з ГЦК, у тым ліку з ранняй стадыяй захворвання, мелі КТК і што вельмі маленькія вузельчыкі ГЦК былі выяўлены пасля 3-5 месяцаў назірання. Zhou 等 人 ， 与 CTC 数量 较 少 的 的 患者 ， ， epcam+ ctc 和 t 细胞 数量 升高 的 患者 发生 hcc 复发 的 风险 高 ， 复发率 为 为 为 为 66,7% 和 10,3% (p <0,001)。 分别 分别 分别 为 为 为 66,7% 和 10,3% (p <0,001)。 Zhou 等 人 发现 与 与 ctc 数量 少 的 患者 相比 ， epcam+ ctc 和 t 细胞 数量 的 患者 发生 hcc 复发 风险 更 ， 复发率 分别 为 为 为 为 为 为 为 为 为 为 为 为 为 为 为 为 10.3% ( p <0,001).............. Чжоу і др.выявілі, што пацыенты з падвышанай колькасцю ЦОК EpCAM+ і рэгулятарных Т-клетак мелі больш высокі рызыка рэцыдыву ГЦК у параўнанні з пацыентамі з меншай колькасцю ЦОК, з частатой рэцыдываў 66,7% і 10,3% адпаведна (P <0,001). Чжоу і інш.выявілі, што пацыенты з павышаным EpCAM+ CTCs і рэгулятарнымі Т-клеткамі мелі больш высокі рызыка рэцыдыву ГЦК у параўнанні з пацыентамі з меншай колькасцю CTCs, з частатой рэцыдываў 66,7% і 10,3% адпаведна (P <0,001).Аб падобным даследаванні паведамілі Zhong et al.68 Акрамя таго, Qi выявіў, што 101 з 112 пацыентаў з ГЦК (90,81%), уключаючы пацыентаў з ранняй стадыяй захворвання, мелі станоўчыя вынікі ЦТК і выявілі вельмі маленькія вузельчыкі ГЦК пасля 3 наведванняў.Назіранне да 5 месяцаў.Яны таксама выявілі CTCs у 12 пацыентаў з хранічнай інфекцыяй HBV і выявілі невялікія пухліны HCC на працягу 5 месяцаў у 2 CTC-станоўчых пацыентаў.69 Такім чынам, CTCs могуць быць выкарыстаны для прагназавання HCC, 70 але яны могуць быць выкарыстаны больш рэгулярна ў якасці прагнастычных біямаркераў.
Як і cfDNA, cfRNA вылучаецца ў кроў праз розныя сістэмы.Гэтыя малекулы ў перыферычнай крыві ўяўляюць сабой ракавую тканіну паходжання.У параўнанні з маркерамі, выяўленымі неінвазіўнымі метадамі, cfRNA больш дынамічна рэгулююцца, тканкаспецыфічныя і багатыя ва пазаклеткавым асяроддзі.Значнасць і дыягнастычнае значэнне 71 мікраРНК (міРНК) пры ГЦК паведамлялася ў многіх даследаваннях.мікраРНК - гэта эндагенныя некадуючыя РНК (нкРНК), якія рэгулююць розныя малекулярна-біялагічныя дзеянні шляхам інгібіравання трансляцыі мэтавых інфармацыйных РНК (мРНК).МіРНК знаходзяцца ў апоптотических целах, інкапсуляваных у экзасомы, але яны таксама могуць стабільна звязвацца з сыроватачнымі вавёркамі і ліпідамі ў перыферычнай крыві і могуць выкарыстоўвацца для ацэнкі ГЦК.МикроРНК ўдзельнічаюць у рэгенерацыі печані, метабалізме ліпідаў, апоптозе, запаленні і развіцці ГЦК.72 Анкагенныя мікраРНК, такія як міР-21, міР-155 і міР-221, добра вядомыя пры ГЦК.У прыватнасці, miR-21 гуляе ключавую ролю ў сінтэзе калагена ў пазаклеткавай матрікса і фіброзе і спрыяе гепатоканцерогенезу шляхам актывацыі гемопоэтических ствалавых клетак.72,73 МіРНК-супрессоры пухлін пры ГЦК ўключаюць мікраРНК-122, мікраРНК-29, сямейства Let-7 і сямейства мікраРНК-15.Сямейства Let-7 складаецца з мноства микроРНК-супрессоров пухлін, накіраваных на сямейства RAS.Сямейства miR-15 уключае miR-15a, miR-15b, miR-16, miR-195 і miR-497, якія маюць камплементарныя паслядоўнасці для пэўных мРНК.Акрамя таго, доўгія некадуючыя РНК (lncRNA) і кальцавыя РНК (cirRNA) таксама важныя для ранняга скрынінга ГЦК.lncRNA ўяўляюць сабой самы шырокі клас ncRNA, уключаючы мРНК-падобныя ncRNA, і ўдзельнічаюць у патагенезе многіх захворванняў чалавека.LncRNA гуляюць рэгуляторную ролю ў мікраасяроддзі печані і хранічных захворваннях печані.74 CircRNAs таксама з'яўляюцца класам ncRNAs з мноствам функцый у рэгуляцыі экспрэсіі генаў.Нядаўна circRNA разглядаюцца ў якасці дыягнастычнага інструмента для HCC.
Цыркулюючая свабодная РНК валодае выдатнай стабільнасцю, уключаючы ўстойлівасць да тэмпературы, pH і РНКазе, што робіць вылучэнне фнРНК з перыферычнай крыві менш стомным пры выкарыстанні стандартных метадаў ачысткі РНК.Найбольш часта выкарыстоўваюцца метады ўключаюць NGS, мікрачыпы і RT-qPCR.NGS дазваляе вымяраць мікраРНК ва ўсім геноме.Аднак гэты метад дарагі і аналіз не стандартызаваны.Наадварот, RT-qPCR недарагі, хутка ўзмацняе нуклеінавыя кіслоты і прапануе шмат пераваг, такіх як больш высокая адчувальнасць, больш высокая дакладнасць, больш шырокі дынамічны дыяпазон і патрабуецца меншая колькасць узораў.Мікрачыпы - яшчэ адзін метад, які выкарыстоўваецца для выяўлення мікраРНК, заснаваны на адчувальнай і спецыфічнай гібрыдызацыі мэтавых мікраРНК з камплементарнымі зондамі ДНК, 75 але аналіз дадзеных мікрачыпаў займае шмат часу.
Паведамляецца, што цыркулюючыя міР-122 і Let-7 патэнцыйна карысныя для дыягностыкі ранняй стадыі ГЦК у групах высокай рызыкі, маркеры ў пацыентаў з перадракавымі вузельчыкамі, звязанымі з HBV, і ранняй стадыяй ГЦК.76 Цай і інш.выявілі, што прадстаўнікі сямейства Let-7 (міР-92, міР-122, міР-125b, міР-143, міР-192, міР-16, міР-126 і міР-199a/b) падвяргаюцца рызыцы хранічнага ГЦК ў хворых гепатытам.Сямейства Let-7 можа служыць эфектыўным сурагатным биомаркеров для прагназавання развіцця ГЦК ў групах высокай рызыкі, звязаных з хранічным гепатытам С. 77 miR-122 валодае высокай дыягнастычнай дакладнасцю ў выяўленні ранняга ГЦК ў пацыентаў з цырозам печані.78 МіР-107, які цыркулюе ў сыроватцы крыві, таксама быў ацэнены на ранніх стадыях ГЦК 79 і паказаў добры патэнцыял у групе насельніцтва высокай рызыкі.Чжоу і іншыя паведамілі, што панэль мікраРНК (міРНК-122, міРНК-192, міРНК-21, міРНК-223, міРНК-26a, міРНК-27a і міРНК-801) можа дыферэнцаваць ГЦК ад хранічнага гепатыту В (ХГВ) і цырозу печані. адчувальнасць склала 79,1% і 75%, а спецыфічнасць - 76,4% і 91,1% адпаведна.80. Мы выявілі, што пры ГЦК, звязаным з HBV, узровень miR150 значна зніжаны ў параўнанні з такімі ў пацыентаў з хранічным ВГВ без ГЦК (адчувальнасць 79,1%, спецыфічнасць 76,5%).-224 быў павышаны пры ГЦК у параўнанні са здаровымі людзьмі кантролю, і аналіз падгруп паказаў больш высокі ўзровень у пацыентаў з ГЦК, звязаным з ВГВ.пацыенты з гепатытам В-асацыяваным цырозам і гепатытам B вызначылі класіфікатар siRNA, які змяшчае сем дыферэнцыяльна экспрэсіраваных siRNA, якія могуць выяўляць гепатыт B у розных кантрольных групах;Дыяпазон AUC пры раннім скрынінгу лепш, чым у добраахвотнікаў AFP.Яны выявілі, што чатыры мікраРНК (miR-1972, miR-193a-5p, miR-214-3p і miR-365a-3p) могуць адрозніць пацыентаў з ГЦК ад пацыентаў без ГЦК.Пяць мікраРНК з падвышанай экспрэсіяй (miR-122-5p, miR-125b-5p, miR-885-5p, miR-100-5p і miR-148a-3p) лічацца патэнцыйнымі інфекцыямі HBV пры ГЦК, цырозе печані і біямаркерах ХГВ, асабліва miR-34a-5p можа быць біямаркерам цырозу печані,85 і можа быць патэнцыйным біямаркерам для ранняга скрынінга ГЦК у групах высокай рызыкі.Найбольш вывучаная lncRNA ў HCC моцна актывуецца пры раку печані (HULC).Іншыя даследаванні паказалі, што HULC, які цыркулюе ў пацыентаў з ГЦК, можа быць выкарыстаны ў якасці дыягнастычнага маркера, таму што гэтая lncRNA моцна рэгулюецца ў пацыентаў з ГЦК у параўнанні са здаровымі людзьмі.71,86 Сярод іншых lnRNA LINC00152 лічыцца лепшай дыягнастычнай lncRNA з-за высокай AUC, адчувальнасці і спецыфічнасці.86 У адным з даследаванняў экспрэсія LINC00152 у перыферычнай крыві паступова павялічвалася ад нармальнага здаровага кантролю да пацыентаў з ХГВ і цырозам печані і, нарэшце, была самай высокай пры ГЦК.Даследаванні экспрэсіі circSMARCA5 у плазме пацыентаў з ГЦК паказалі прагрэсавальнае зніжэнне экспрэсіі пры ГЦК ад гепатыту да цырозу і предраковые паразы.87 Аналіз крывых ROC пацвердзіў патэнцыял гэтых circRNAs у адрозненні пацыентаў з гепатытам або цырозам печані ад пацыентаў з ГЦК, асабліва з узроўнем АФП ніжэй за 200 НГ/мл.Акрамя таго, Чжу прааналізаваў 13 617 цыклічных РНК ва ўзорах плазмы пацыентаў з ГЦК, звязаным з ВГВ, і пацвердзіў, што 6 цыклічных РНК экспрэсіруюцца па-рознаму пры ГЦК і цырозе, звязаным з ВГВ, што сведчыць аб тым, што кРНК могуць быць карыснымі.маркеры для ранняга скрынінга груп высокай рызыкі, такіх як тыя, якія звязаны з захворваннямі печані, пацыенты са склерозам.88
Экзасомы — мембранныя везікулы дыяметрам 40—160 нм;некалькі ўнутрыклеткавых бурбалак зліваюцца з клеткавай мембранай і вызваляюцца ў пазаклеткавай матрікса.Яны ўтрымліваюць шмат актыўных кампанентаў, уключаючы ліпіды, вавёркі, РНК і ДНК, і гуляюць ключавую ролю ў камунікацыі паміж клеткамі, як HCC, так і не-HCC.89,90 Экзасомы рэгулююць прагрэсаванне ГЦК шляхам актывацыі фібрабластаў і зорчатых клетак гепатацытаў, імунных клетак, нармальных гепатацытаў і клетак ГЦК.91 У мікраасяроддзі пухліны опухолевые клеткі вырабляюць вялікую колькасць экзасом, якія пераносяцца ад ракавых клетак да няспелых клетак, якія, у сваю чаргу, удзельнічаюць у анкагенезе, дэградацыі і перадачы клеткавых сігналаў.92 Даследаванні паказалі, што экзасомы могуць пераносіць онкогены ў нармальныя клеткі падчас паталагічных працэсаў, што можа быць адным з механізмаў інвазіі пухліны і метастазірованія.93 Роля экзасом у прагрэсаванні рака можа быць дынамічнай і спецыфічнай для тыпу рака. 89 Экзасомы могуць быць унутраны суседнімі або аддаленымі клеткамі для рэгулявання некалькіх генаў-мішэняў у клетках-рэцыпіентах, якія могуць удзельнічаць у міжклеткавай сувязі іёнаў і ўзаемадзеянні клеткавага мікраасяроддзя, яны могуць апасродкуе клеткавую сігналізацыю і метабалізм.94 Характарыстыкі і дынамічныя змены малекул экзасомнага грузу непасрэдна адлюстроўваюць характарыстыкі і дынамічныя змены бацькоўскіх опухолевых клетак, 95 што таксама з'яўляецца асновай для выкарыстання экзасом у дыягностыцы і прагнозе рака, а таксама для прагназавання індывідуальнага адказу на супрацьпухлінную тэрапію. ..96
Традыцыйныя лабараторныя метады вылучэння і аналізу экзасом з'яўляюцца складанымі, шматэтапнымі і працаёмкімі, уключаючы ультрацэнтрыфугаванне, фільтраванне, эксклюзійную храматаграфію, імунааффінную ачыстку, Вестэрн-блот, імунаферментны аналіз (ELISA), ПЦР і праточны аналіз.мініяцюрныя сістэмы і платформы lab-on-a-chip з выкарыстаннем мікра/нанатэхналогій шырока распрацоўваюцца для хуткай і зручнай ізаляцыі экзасом in situ.Аналіз адсочвання наначасціц (NTA) - гэта шырока выкарыстоўваны метад для характарыстыкі памеру і канцэнтрацыі экзасом, уключаючы такія метады, як магнітныя наначасціцы і полігідраксіалканааты.Мікрафлюідныя і электрахімічныя метады таксама могуць хутка выяўляць экзасомы з высокім ураджаем.
Экзасомальныя вавёркі з'яўляюцца важнымі маркерамі для дыягностыкі ГЦК.У даследаванні Arbelaiz узровень 98 RasGAP SH3-звязвае бялку (G3BP) і рэцэптара палімернага імунаглабуліну (PIGR) быў значна павышаны ў экзасомах, атрыманых з HCC, і меркаваная камбінаваная эфектыўнасць двух бялкоў была вышэй, чым у AFP.Перагрузка жалезам - важны фактар, які спрыяе развіццю ГЦК.Цзэн паведаміў, што гепсідын можа гуляць ключавую ролю ў рэзістэнтнасці да ГЦК.99 Экзасомы, атрыманыя з сываратак пацыентаў з ГЦК, мелі значна большую колькасць копій варыянтаў мРНК гепсідыну, чым іх здаровыя аналагі, што сведчыць аб тым, што гепсідын можа быць новым дыягнастычным біямаркерам для ГЦК.Бялок 14-3-3ζ у экзасомах, які выпрацоўваецца 100 HCC, можа паменшыць актывацыю, праліферацыю і дыферэнцыяцыю Т-клетак і можа выклікаць трансфармацыю Т-клетак у рэгулятарныя Т-клеткі, што прыводзіць да знясілення Т-клетак.101 Гэта пацвярджаецца некалькімі даследаваннямі, якія даследуюць ухіленне пухліны ад імуннага нагляду, 102 што можа спрыяць узнікненню пухлін ГЦК.
У дадатак да прысутнасці экРНК у плазме або сыроватцы крыві, экзасомы, узбагачаныя РНК, можна выкарыстоўваць для неінвазіўнай стадыі ў рэальным часе пры раннім скрынінгу пухліны і для вызначэння эвалюцыі пухліны і рэакцыі на тэрапію.Узровень экзосомальной микроРНК-21 у сыроватцы крыві ў групе ГЦК быў у 2,21 разы вышэй, чым у групе ХГВ, а ў групе ГЦК - у 5,57 разы вышэй, чым у здаровай папуляцыі.У даследаванні Wang экзасомы значна павялічвалі ГЦК у параўнанні з пацыентамі з цырозам са значэннямі AUC 0,83 (95% дзі 0,74–0,93) і 0,94 (95% дзі 0,88–1,00).104 Атрыманыя дадзеныя высветлілі ўдзел спецыфічных экзасомальных малекул грузу ў рэгуляцыі анкагенезу і прагрэсавання ГЦК.105 Экспрэсія міР-221, міР-103, міР-181c, міР-181a, міР-93 і міР-26a ў сыроватцы адпавядае.і метастазы, і ўзроўні miR21 былі значна вышэй у пацыентаў з ГЦК, чым у здаровых кантрольных груп, а таксама ў пацыентаў з ХГВ.102 LncRNA мела патэнцыйнае дыягнастычнае значэнне пры ГЦК.Даследаванні паказалі, што экзасомы, атрыманыя з сыроваткі пацыентаў з ГЦК, маюць значна больш высокія ўзроўні LINC00161, LINC000635 і lncRNA, актываваных трансфармуючым фактарам росту-β, чым у пацыентаў без ГЦК, і гэтыя lncRNA моцна звязаны са стадыяй TNM і аб'ёмам пухліны.110 Канільяра і інш.Выяўлена, што экзасомы CD90+ экспрэсуюць высокія ўзроўні lncRNAH19, што значна павялічвае вызваленне фактару росту эндатэлю сасудаў (VEGF) і выпрацоўку рэцэптараў VEGF-R1, тым самым стымулюючы ангіягенез.93 CircRNAs - гэта яшчэ адзін тып экзасомальных ncRNAs - экспрэсіўныя на больш нізкіх, але стабільных узроўнях у розных відаў, circRNAs таксама дэманструюць спецыфічнасць для тыпу клеткі, тыпу тканіны, стадыі развіцця і рэгулятарнай актыўнасці.111 circRNA з'яўляюцца дыягнастычнымі біямаркерамі ранняга і малаінвазіўнага рака.112 Нядаўнія клінічныя выпрабаванні паказалі, што спецыфічнасць асобных мікраРНК у прагназаванні ГЦК не ідэальная.Такім чынам, комплекснае выяўленне з выкарыстаннем некалькіх аналізаў (напрыклад, miR-122 і miR-48a ў спалучэнні з AFP) можа палепшыць ідэнтыфікацыю ранняга ГЦК і дыферэнцыяцыю ГЦК ад цырозу.100
Пацыенты з ХГВ і цырозам печані - найбольш частая група высокай рызыкі развіцця ГЦК.Для груп высокай рызыкі пасля дасягнення ўстойлівага вірусалагічнага адказу варта распрацаваць эканамічна эфектыўную стратэгію назірання, заснаваную на рызыцы ГЦК, а ранні скрынінг з'яўляецца ключом да паляпшэння дыягностыкі і лячэння ГЦК з высокім суадносінамі кошту і эфектыўнасці2. ..Метады ранняга скрынінга на рак маюць шмат абмежаванняў: эфектыўныя метады ранняга скрынінга не распрацаваны для большасці відаў раку, і прыхільнасць звычайна нізкая.У параўнанні з традыцыйнымі раннімі метадамі скрынінга тэхналогія вадкаснай біяпсіі мае відавочныя перавагі: лёгкасць адбору пробаў, выяўленне панрака, добрую ўзнаўляльнасць пробы і эфектыўны адказ на гетэрагеннасць пухліны.Улічваючы эканамічную эфектыўнасць метадаў, звязаных з вадкаснай біяпсіяй, іх выкарыстанне ў скрынінгу ГЦК не было руцінна праверана.Нягледзячы на ​​прагрэс у дакладным выяўленні на малекулярным узроўні, вадкасная біяпсія каштуе дорага для выяўлення ГЦК у мэтавых пацыентаў, што абмяжоўвае яе шырокае выкарыстанне ў параўнанні са спецыфічнымі працэдурамі візуалізацыі, такімі як УГД і магнітна-рэзанансная тамаграфія.113,114 Аднак папярэдняе даследаванне паказала, што вадкая біяпсія паказала значную карысць з пункту гледжання колькасці гадоў жыцця з папраўкай на якасць (QALY).115 Таксама былі паказаны перавагі вадкаснай біяпсіі пры ранняй карцыноме страўніка і насаглоткі.116,117 Цяперашняе меркаванне заключаецца ў тым, што вадкая біяпсія можа дапаўняць біямаркеры сыроваткі і рэнтгеналагічны скрынінг пры выяўленні і дыягностыцы пухлін.117 118
Згодна з сучаснай літаратуры, тэхналогія вадкаснай біяпсіі паказала значна больш высокую адчувальнасць і спецыфічнасць пры раннім скрынінгу груп высокай рызыкі рака печані.Незалежна ад тыпу вадкаснай біяпсіі, яна можа адрозніць ГЦК ад людзей з высокай рызыкай без ГЦК, што сведчыць аб важнасці ранняга абследавання, паколькі адрозненні паміж людзьмі з высокай рызыкай і здаровымі людзьмі відавочныя.ctDNA мае кароткі перыяд паўраспаду і можа выкарыстоўвацца для выяўлення ГЦК, таму любыя змены ў кДНК, атрыманай з пухліны, могуць даць канкрэтныя доказы прагрэсавання пухліны ў рэжыме рэальнага часу, асабліва для невялікіх пухлін.Высокі ўзровень ctDNA паказвае на развіццё і распаўсюджванне рака і з'яўляецца раннім паказчыкам прагрэсавання і рэцыдыву.Акрамя таго, на аснове вынікаў ctDNA пацыенты могуць атрымаць індывідуальнае лячэнне і наступнае назіранне.119 Спецыфічныя месцы метылявання могуць быць лепшым маркерам, чым AFP, для ранняй ідэнтыфікацыі ГЦК і цыратычных вузельчыкаў.У аперабельных выпадках ГЦК высокія ўзроўні кДНК сведчаць аб мікрасасудзістай інвазіі і пасляаперацыйных рэцыдывах і метастазах.Змены колькасці копій звязаны з выжывальнасцю пацыентаў з ГЦК.Можна выказаць здагадку, што ацэнка кДНК можа ўдзельнічаць у агульным лячэнні ГЦК, а кДНК можа служыць эфектыўным індыкатарам тэрапеўтычнай мадуляцыі.Маркеры, заснаваныя на спецыфічных генетычных мутацыях у ctDNA, былі прыняты ў клінічных рэкамендацыях для прагназавання эфектыўнасці і маніторынгу ўстойлівасці да лекаў.Тэставанне ктДНК можа быць найбольш карысным інструментам вадкай біяпсіі для ранняга скрынінга.КТК таксама гуляюць ключавую ролю ў раннім скрынінгу груп высокай рызыкі ГЦК.Розныя маркеры ГЦК-асацыяваных КТК маюць асаблівае значэнне ва ўзнікненні, развіцці і рэцыдыве ГЦК.Як мембранныя везікулы, экзасомы ўдзельнічаюць у міжклеткавых зносінах, асабліва ў клетках HCC.МікраРНК, якія цыркулююць, стабільныя ў крыві і, такім чынам, могуць быць больш карыснымі для ранняга скрынінга ГЦК.Паступова былі адкрыты экзасомныя вавёркі і экзасомы, багатыя РНК, і была пацверджана іх прагнастычная эфектыўнасць для ГЦК.Цікава, што розныя этыялогіі ГЦК таксама могуць быць звязаны з рознымі мутацыямі, таму мы можам выбраць розныя біямаркеры для ранняга скрынінга на аснове розных этыялогій ГЦК.120
Аднак сучасныя метады вадкаснай біяпсіі сумніўныя з пункту гледжання стабільнасці і не могуць самастойна праводзіць ранні скрынінг або маніторынг ГЦК, але ўсё роўна могуць дапаўняць індывідуальны скрынінг і дыягностыку.121 Як форма вадкай біяпсіі, выяўленне і візуалізацыя ctDNA, CTC, cfRNA і AFP або PIVKA-II, звязаных з экзасомамі, маюць перспектыўныя магчымасці для ранняй дыягностыкі і прагнозу ГЦК.Аднак дакладны механізм выхаду ктДНК у кроў яшчэ не высветлены.Выяўленне асноўных біялагічных уласцівасцяў ктДНК можа палегчыць яе выкарыстанне ў якасці маркера.Невялікая колькасць ктДНК у цыркуляцыі і строгія патрабаванні да апрацоўкі ўзораў з'яўляюцца праблемамі для клінічнага ўкаранення выяўлення кДНК пры ГЦК.Акрамя таго, генетычныя мутацыі не маюць спецыфічных асаблівасцяў, якія дазваляюць дакладна вызначыць канцерогены.Паколькі шматлікія генетычныя і саматычныя варыянты таксама прысутнічаюць у нармальных тканінах, генетычныя мутацыі, выяўленыя пры біяпсіі вадкасці, могуць мець абмежаваную карысць пры раннім скрынінгу на ГЦК.122 Абмежаванні дакладна вызначаных карысных генаў-мішэняў і біямаркераў, якія дапамагаюць адрозніць кДНК ад непухліннай ДНК, з'яўляюцца найбольш важнымі праблемамі пры выкарыстанні кДНК.недастатковая прыдатнасць адчувальных і спецыфічных маркераў для выяўлення КТК.Былі знойдзены толькі жыццяздольныя клеткі з метастатическим патэнцыялам, і аптымальная камбінацыя маркераў, узбагачаных CSC, была незразумелай.Ізаляцыя CTC для культуры і ацэнка іх мутацыйных профіляў таксама з'яўляецца складанай задачай.З-за праблем з ідэнтыфікацыяй, ізаляцыяй і ачысткай экзасом канкрэтны малекулярны механізм усё яшчэ незразумелы, і папярэднія даследаванні механізму экзасом і ГЦК не былі глыбокімі, а таксама таго, як мікраРНК, lncRNA і вавёркі сартуюцца ў экзасомы , і незразумела, ці з'яўляецца паглынанне экзасом працэсам пэўнага тыпу.Выкарыстанне экзасом для дыягностыкі і лячэння ГЦК знаходзіцца яшчэ на даклінічнай стадыі.Адсутнасць стандартызацыі працэдур вадкай біяпсіі, такіх як тып прабірак, якія выкарыстоўваюцца для збору крыві, аб'ём крыві, захоўванне і выяўленне проб, ізаляцыя і ўзбагачэнне, можа перашкодзіць іх выкарыстанню ў звычайнай клінічнай практыцы з-за адрозненняў у практыцы ў розных медыцынскіх цэнтрах.Эфектыўнасць вадкай біяпсіі ў раннім скрынінгу, дыягностыцы, ацэнцы эфектыўнасці і прагназаванні ГЦК яшчэ трэба будзе вывучыць, асабліва для груп высокай рызыкі.Тэхналогія вадкаснай біяпсіі мае вялікі патэнцыял і, як чакаецца, у бліжэйшай будучыні атрымае шырокае прымяненне ў клінічнай практыцы рака печані.
1. Sung H., Furley J., Siegel RL і інш.Сусветная статыстыка рака 2020: GLOBOCAN ацэньвае захворванне і смяротнасць ад 36 відаў раку ў 185 краінах.CA Cancer J Clin.2021;71(3):209-249.doi: 10.3322/caac.21660
2. Штаб-кватэра Нацыянальнай камісіі па ахове здароўя.Крытэрыі дыягностыкі і лячэння першаснага рака печані (выданне 2022 г.) [J].Часопіс клінічных захворванняў печані, 2022, 38 (2): 288-303.doi: 10.3969/j.issn.1001-5256.2022.02.009
3. Zhou J, Sun H, Wang Z і інш.Кіраўніцтва па дыягностыцы і лячэнні гепатоцеллюлярную карцынома (выданне 2019 г.).Рак печані.2020; 9 (6): 682-720.doi: 10.1159/000509424
4. Кокудо Н, Такемура Н, Хасэгава К і інш.Клінічныя практычныя рэкамендацыі па гепатацэлюлярнай карцыноме: Японскае таварыства хвароб печані, 2017 г. (4-е рэкамендацыі JSH-HCC), абнаўленне 2019 г.Рэзервуар хваробы печані.2019;49(10):1109–1113.doi:10.1111/hepr.13411
5. Barrera-Saldana HA, Fernandez-Garza LE, Barrera-Barrera SA Вадкая біяпсія пры хранічных захворваннях печані.Эн Гепато.2021;20:100197.doi:10.1016/j.aohep.2020.03.008
6. Тай Т.К.Ю., Тан П.Х.Вадкая біяпсія рака малочнай залозы: мэтанакіраваны агляд.Arch Pathol Lab Med.2021;145(6):678–686.doi: 10.5858/arpa.2019-0559-RA
7. Канвал Ф., Сінгал А. Г. Назіранне за гепатоцеллюлярную карцынома: перадавыя сучасныя практыкі і будучыя напрамкі.Гастраэнтэралогіі.2019; 157 (1): 54-64.doi:10.1053/j.gastro.2019.02.049
8. Еўрапейская даследчая асацыяцыя L, Еўрапейская арганізацыя R, C Therapeutics.Клінічныя рэкамендацыі EASL-EORTC: лячэнне гепатоцеллюлярную карцынома.J Гепарын.2012;56(4):908–943.doi:10.1016/j.jhep.2011.12.001
9. Чжан Г., Ха С.А., Кім Х.К. і інш.Камбінаваны аналіз AFP і HCCR-1 у якасці карысных сералагічныя маркераў пры дробнай гепатоцеллюлярной карцыноме: проспективное кагортнае даследаванне.Дыс Марк.2012;32(4):265–271.doi: 10.3233/DMA-2011-0878
10. Чэнь С, Чэнь Х, Гао С і інш.Дыферэнцыяльная экспрэсія мікраРНК-125b плазмы пры захворваннях печані, звязаных з вірусам гепатыту У, і дыягнастычны патэнцыял гепатоцеллюлярной карцыномы, выкліканай вірусам гепатыту У.Рэзервуар хваробы печані.2017;47(4):312-320.doi:10.1111/hepr.12739
11. Halle PR, Фостэр Ф., Кудо М. і інш.Біялогія і значэнне альфа-фетопротеина пры гепатоцеллюлярную карцынома.Печань міжнар.2019;39(12):2214–2229.doi: 10.1111/liv.14223
12. Omata M, Cheng AL, Kokudo N і інш.Клінічныя рэкамендацыі па лячэнні гепатоцеллюлярную карцынома ў Азіяцка-Ціхаакіянскім рэгіёне: абнаўленне 2017 г.Міжнародная арганізацыя па захворваннях печані.2017;11(4):317–370.doi: 10.1007/s12072-017-9799-9
13. Сюй Фэй, Чжан Лі, Хэ Вэй і інш.Дыягнастычнае значэнне сыроваткі PIVKA-II асобна або ў спалучэнні з АФП у кітайскіх пацыентаў з гепатоцеллюлярную карцынома.Дыс Марк.2021;2021:8868370.doi: 10.1155/2021/8868370
14. Durin L., Praradines A., Basset S. et al.Біяпсія немелкоклеточного рака лёгкага без плазмы гумаральнай вадкасці: бліжэй да пухліны!вочка.2020;9(11).doi: 10.3390/cells9112486
15. Mader S, Pantel K. Вадкая біяпсія: сучасны стан і будучыя перспектывы.Лячэнне Oncol Res.2017;40(7-8):404-408.doi: 10.1159/000478018
16. Palmirotta R, Lovero D, Cafforio P і інш.Вадкасная біяпсія рака: мультымадальны дыягнастычны інструмент у клінічнай анкалогіі.Adv Med Oncol.2018;10:1758835918794630.doi: 10.1177/1758835918794630
17. Мандэл П., Метаіс П. Нуклеінавыя кіслоты ў плазме чалавека.CR Seances Soc Biol Fil.1948;142(3-4):241-243.
18. Mouliere F, Chandrananda D, Piskorz AM і інш.Пашыранае выяўленне цыркулявалай пухліннай ДНК з дапамогай аналізу памеру фрагмента.Навука перакладае медыцыну.2018;10:466.doi:10.1126/scitranslmed.aat4921
19. Underhill HR, Kitzman JO, Hellwig C. і інш.Даўжыня фрагмента ДНК цыркулявалай пухліны.Гены PLOS.2016;12(7):e1006162.doi:10.1371/journal.pgen.1006162
20. Cheng F, Su L, Qian C. Цыркулюючая ДНК пухліны: перспектыўны біямаркер у вадкаснай біяпсіі рака.пухліна-мішэнь.2016; 7 (30): 48832–48841.doi:10.18632/oncotarget.9453
21. Bettegovda S., Sauzen M., Leary RJ і інш.Выяўленне цыркулюючай ДНК пухліны на ранніх і позніх стадыях злаякасных пухлін чалавека.Навука перакладае медыцыну.2014;6(224):224ra24.doi:10.1126/scitranslmed.3007094
22. Мехес Г. Вадкая біяпсія для мутацыйнага прагнастычнага аналізу саліднага рака: пункт гледжання патолагаанатама.J Біятэхналогія.2019;297:66-70.doi: 10.1016/j.jbiotec.2019.04.002
[PubMed] 23. Ленарц Л, Туверы С, Яцэнка Т і інш.Ранняе выяўленне пухліны з дапамогай скрынінга ДНК цыркулявалай плазмы: шуміха ці надзея?Бельгійскае клінічнае права.2020 год;75(1):9-1 doi:10.1080/17843286.2019.1671653
24. Нішыда Н. Уплыў віруса гепатыту і старэння на метилирование ДНК у гепатоканцерогенезе чалавека.Гістапаталогіі.2010;25(5):647–654.doi: 10.14670/HH-25.647